Иммуногистохими́ческое иссле́дование — метод микроскопического исследования тканей, обеспечивающий наиболее специфическое выявление в них искомых веществ и основанный на обработке срезов маркированными специфическими антителами к выявляемому веществу, которое в данной ситуации служит антигеном. Впервые способ окрашивания клеточных и тканевых компонентов с помощью специфических антител для микроскопического исследования был предложен A. Coons и соавторами в 1941 году; позднее были разработаны антитела, помеченные не флуоресцентными красителями, а ферментами.
Прямой иммуногистохимический метод
Прямой иммуногистохимический метод основан на реакции специфического связывания маркированных антител непосредственно с выявляемым веществом (рис. 1).
Непрямой иммуногистохимический метод
Непрямой иммуногистохимический метод является более чувствительным, основан на том, что немаркированные первичные антитела связываются с искомым антигеном (выявляемым веществом), а далее уже их выявляют при помощи вторичных меченых антител, при этом первичные антитела служат для вторичных антигенами (рис. 2).
Способы маркировки антител
Маркировка антител производится путём их связывания с одной из следующих групп веществ:
- флуоресцентные красители (родамин, флуоресцеин);
- ферменты (щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена) — далее выявляются гистохимически;
- электронно-плотные частицы (коллоидное золото, ферритин).
Практическое применение
- идентификация клеток различных типов по их уникальным маркерным признакам;
- изучение синтетических и секреторных процессов;
- выявление гормонов и рецепторов к ним.
См. также
Литература
- Быков В. Л. Цитология и общая гистология. — СПб.: СОТИС, 1999. — С. 18-19. — ISBN 5-85503-080-6.